Cum oamenii de știință izolează ADN-ul pentru a-l studia?

Răspuns:

Există câțiva pași pentru a face acest lucru, vă rugăm să ignorați-mi englezii răi, sper că puteți înțelege în continuare procesul.

Explicaţie:

Acest lucru nu este atât de dificil cum credeți.

Să presupunem că vrem să izolați ADN-ul dintr-o timus de vițel, trebuie să urmați aceste instrucțiuni (aceleași pentru un măr în măsura în care știu, dar există mici variații):

1. Luați 3 bucăți de 3 grame și tăiați-o în bucăți mici, cât mai puțin posibil.

2. Puneți-l într-un blender, cu 75 ml citrat de sodiu salin (SSC) pe bucată și asigurați-vă că lama blenderului este complet acoperită cu SSC, deci adăugați o bucată de timus dacă doriți.

   SSC asigură faptul că membranele celulare sunt dizolvate.

   Continuați să amestecați până când totul este neted.

3. Puneți-l într-o eprubetă pentru centrifugă și alimentați-l cu un alt tub astfel încât centrifuga să nu se rupă

4. Se pune tubul în centrifugă timp de 20 de minute la 5000 rot / min

5. Când scoateți tuburile din centrifugă, ar trebui să vedeți două componente. Fundul inferior are o substanță solidă, aceasta se numește peleta și aceasta menține nucleele celulare cu ADN. Veți vedea, de asemenea, o substanță lichidă, care se numește supernatant, și aceasta constă din SSC cu membranele celulare dizolvate.

6. Se toarnă supernatantul într-o mișcare fluidă, aceasta se numește decantare și vă lasă cu peleta.

7. Puneți o cantitate mică de 2,2 M NaCI în tubul cu peleți, astfel încât peleta să fie doar acoperită cu NaCI. NaCI determină precipitarea proteinelor care înconjoară ADN-ul.

8. Se amestecă cu un tub de testare gol sau cu tija de agitare. În cele din urmă ar trebui să obțineți două componente. Proteinele de pe fund și un fluid vâscos deasupra.

9. Scoateți lichidul vâscos cu o pipetă și asigurați-vă că nu luați proteine cu fluidul vâscos. (bucăți foarte mici de proteine sunt foarte greu de evitat, dar încercați să evitați cât mai multe proteine posibil)

10. Puneți lichidul vâscos pe care l-ați pipetat într-un pahar și adăugați 2 ori mai mult etanol la acesta. Dar adăugați etanolul ușor deoarece nu doriți să îl amestecați cu ADN-ul. La interfața dintre etanol și fluidul vâscos ar trebui să vedeți bule de ADN care apar.

11. Ușor de mișcat cu o tijă de sticlă, ADN-ul este încărcat negativ, așa că trebuie să rămână la tijă.

12. Puneți-l într-o eprubetă și dizolvați-l cu SSC.

O mașină specială vă poate spune cât de mult ADN ați izolat și cât de curat este.