De ce enzimele de restricție sunt ținute în soluție de glicerol 50%?

De ce enzimele de restricție sunt ținute în soluție de glicerol 50%?
Anonim

Răspuns:

Pentru a le păstra intacte …

Explicaţie:

Enzime de restricție sunt folosite în cantități foarte mici, dar de obicei sunt achiziționate în loturi puțin mai mari.

Dacă pentru nimic altceva, preferați de obicei să faceți diferite teste cu același lot. Lotul achiziționat trebuie așadar stocat pentru o perioadă lungă de timp.

Cele mai multe enzime sunt perfect fericite în tampon la 4 grade Celsius pentru o vreme, dar se vor degrada în cele din urmă. 24 de ore sunt, de obicei, limita acceptată.

Pentru stocarea pe termen lung, lotul trebuie înghețat. -20C este standardul și îl va păstra timp de câteva luni. Pentru perioade mai lungi (de exemplu, unul sau mai mulți ani) -70C este norma.

Este necesar să se congele rapid și în recipiente mici (de exemplu, Eppendorf) pentru a evita decongelarea / refrigerea prea des.

Pentru a evita deteriorarea proteinei la astfel de temperaturi scăzute, se pot adăuga stabilizatori, cum ar fi DTT (Di-Thio-Treitol), albumină serică și, cel mai important, Glycerol (5-50%)

Destul de ciudat, la -20C este necesar să se utilizeze 50% Glycerol, în timp ce la -70 Glycerol nu este cu adevărat necesar, deși adiția poate ajuta la stabilizarea proteinei ….